Spectrophotometry – Phần 4

Các ứng dụng 

• Ước tính nồng độ cácbon hữu cơ hòa tan
• Hấp thụ cực tím Cụ thể đối với số liệu tính aromaticity
• Thử nghiệm của Bial về nồng độ pentose

Ứng dụng thử nghiệm 
Như được mô tả trong phần ứng dụng, quang phổ có thể được sử dụng trong cả phân tích định lượng và định lượng DNA, RNA và protein. Phân tích định tính có thể được sử dụng để ghi lại các phổ của các hợp chất bằng cách quét các vùng bước sóng rộng để xác định các đặc tính hấp thụ (cường độ của màu) của hợp chất ở mỗi bước sóng.  Một thí nghiệm có thể chứng minh được những cách sử dụng khác nhau mà sự quang phổ có thể nhìn thấy có thể là sự phân ly của β-galactosidase từ một hỗn hợp các protein khác nhau. Phương pháp quang phổ học được sử dụng tốt nhất để giúp xác định số lượng tinh khiết mẫu của bạn đã trải qua so với tổng lượng protein. Bằng cách thực hiện phép sắc ký ái lực bạn có thể cô lập B-Galactosidase và điều này có thể được kiểm tra bằng cách phản ứng các mẫu thu thập với ONPG và xác định xem mẫu có chuyển sang màu vàng hay không.  Sau khi thử nghiệm mẫu ở 420 nm cho tương tác cụ thể với ONPG và ở mức 595 đối với Bradford Assay, lượng thanh lọc có thể được đánh giá một cách định lượng.  Ngoài phép đo quang phổ này có thể được sử dụng song song với các kỹ thuật khác như điện di SDS-Page để làm sạch và cô lập các mẫu protein khác nhau.

Quang phổ hồng ngoại 
Máy đo quang phổ được thiết kế cho vùng hồng ngoại khá khác nhau do các yêu cầu kỹ thuật của đo lường ở khu vực đó. Một yếu tố chính là loại máy quang phổ có sẵn cho các vùng quang phổ khác nhau, nhưng đo hồng ngoại cũng là thách thức bởi vì hầu như tất cả mọi thứ phát ra ánh sáng hồng ngoại như bức xạ nhiệt, đặc biệt ở các bước sóng vượt quá 5 μm.

Một sự phức tạp khác là một vài vật liệu như thủy tinh và nhựa hấp thụ ánh sáng hồng ngoại, làm cho nó không tương thích với môi trường quang học. Vật liệu quang học lý tưởng là muối, không hấp thụ mạnh. Các mẫu cho quang phổ hồng ngoại có thể được bôi nhọ giữa hai đĩa kali bromua hoặc đất với bromua kali và ép thành một viên. Các dung dịch nước phải được đo, dung dịch bạc clorua không hòa tan được sử dụng để tạo ra tế bào.

Spectroradiometers 
Spectroradiometers, hoạt động gần giống như quang phổ khuếch đại, được thiết kế để đo mật độ quang phổ của ánh sáng. Các ứng dụng có thể bao gồm đánh giá và phân loại ánh sáng cho nhà cung cấp bán hoặc cho khách hàng để xác nhận đèn mà họ quyết định mua theo các thông số kỹ thuật của họ. Các thành phần:

• Nguồn sáng chiếu lên hoặc qua mẫu.
• Mẫu truyền hoặc phản xạ ánh sáng.
• Máy phát hiện phát hiện có bao nhiêu ánh sáng được phản xạ từ hoặc truyền qua mẫu.
• Máy dò sau đó chuyển đổi lượng ánh sáng mà mẫu truyền hoặc phản xạ thành một số.