Phép sắc ký giấy là một phương pháp phân tích được sử dụng để tách các hóa chất hoặc chất màu. Nó được sử dụng chủ yếu như là một công cụ giảng dạy, đã được thay thế bằng các phương pháp sắc ký khác, chẳng hạn như sắc ký lớp mỏng. Một phiên bản sắc ký giấy, sắc ký hai chiều liên quan đến việc sử dụng hai dung môi và xoay giấy 90 ° ở giữa. Điều này rất hữu ích để tách hỗn hợp phức tạp của các hợp chất có cực phân cực, ví dụ như các axit amin. Thiết lập có ba thành phần. Giai đoạn di động là một giải pháp di chuyển lên giai đoạn tĩnh, do hoạt động mao dẫn. Giai đoạn di động nói chung là một hỗn hợp dung môi cồn, trong khi pha tĩnh là một dải của giấy sắc ký, còn được gọi là sắc ký đồ. Phương pháp sắc ký được gọi là phép sắc ký hấp phụ nếu pha tĩnh là rắn
Giá trị, chất tan và dung môi Rƒô
Hệ số chậm (Rƒ) có thể được định nghĩa là tỉ số của khoảng cách đi qua chất tan tới khoảng cách đi qua dung môi. Các giá trị Rƒ thường được biểu diễn bằng một phần của hai chữ số thập phân. Nếu giá trị R của một giải pháp là bằng không thì chất hòa tan vẫn ở giai đoạn tĩnh và do đó nó không động. Nếu giá trị Rƒ = 1 sau đó chất tan không có ái lực cho pha tĩnh và đi với mặt trước của dung môi. Để tính giá trị Rƒ, lấy khoảng cách di chuyển của chất chia cho khoảng cách đi qua dung môi (như đã đề cập ở trên về tỷ lệ). Ví dụ, nếu một hợp chất đi qua 9,9 cm và dung môi đi trước 12,7 cm, (9,9 / 12,7) giá trị Rƒ = 0,779 hoặc 0,78. Giá trị Rƒ phụ thuộc vào nhiệt độ và dung môi được sử dụng trong thí nghiệm, vì vậy một số dung môi đưa ra một số giá trị Rƒ cho cùng một hỗn hợp của hợp chất. Dung môi trong sắc ký là chất lỏng được đặt vào giấy, và dung môi là mực đang được tách ra.
Các sắc tố và phân cực
Phép sắc ký giấy là một phương pháp để kiểm tra độ tinh khiết của các hợp chất và xác định các chất. Phép sắc ký giấy là một kỹ thuật hữu ích vì nó tương đối nhanh và chỉ cần một lượng nhỏ vật liệu. Sự phân tách trong sắc ký bằng giấy liên quan đến các nguyên lý tương tự như trong sắc ký lớp mỏng, vì nó là một loại sắc ký lớp mỏng. Trong sắc ký giấy, các chất được phân bố giữa một pha tĩnh và một pha di động. Giai đoạn tĩnh là nước bị mắc kẹt giữa các sợi xenlulo của giấy. Giai đoạn di động là một giải pháp phát triển di chuyển lên giai đoạn tĩnh, mang các mẫu với nó. Các thành phần của mẫu sẽ tách biệt dễ dàng theo mức độ mạnh mẽ của chúng hấp thụ vào pha tĩnh so với mức độ chúng tan trong pha động.
Khi một mẫu hóa chất màu được đặt trên giấy lọc, các màu sắc tách biệt với mẫu bằng cách đặt một đầu của giấy trong dung môi. Dung môi khuếch tán lên giấy, hòa tan các phân tử khác nhau trong mẫu theo cực của các phân tử và dung môi. Nếu mẫu có nhiều hơn một màu, có nghĩa là nó phải có nhiều hơn một loại phân tử. Do các cấu trúc hóa học khác nhau của mỗi loại phân tử, cơ hội rất cao, mỗi phân tử sẽ có ít nhất một cực khác nhau, cho mỗi phân tử một độ hòa tan khác nhau trong dung môi. Sự hòa tan không bình đẳng làm cho các phân tử màu khác nhau rời khỏi dung dịch ở những nơi khác nhau khi dung môi tiếp tục di chuyển lên giấy. Càng hòa tan một phân tử càng cao, nó sẽ di chuyển lên giấy. Nếu một chất hóa học không cực cực, nó sẽ không hòa tan trong một dung môi cực. Điều này cũng tương tự đối với một chất cực cực và một dung môi không cực.
Điều rất quan trọng cần lưu ý là khi sử dụng nước (một chất rất cực) như một dung môi, càng có nhiều màu phân cực, thì nó sẽ càng cao trên giấy.
Các loại sắc ký giấy
Làm sắc ký giấy giảm – Phát triển sắc ký đồ được thực hiện bằng cách cho phép dung môi di chuyển xuống dưới giấy. Ở đây, giai đoạn di động được đặt trong ngăn chứa dung môi ở trên cùng. Điểm được giữ ở đầu và dung môi chảy xuống giấy từ phía trên.
Tăng sắc ký giấy – Tại đây dung môi di chuyển lên giấy sắc ký. Cả hai sắc độ trên giấy tăng và giảm dần được sử dụng để tách các chất hữu cơ và vô cơ.
Chromatography từ trên xuống dưới – Đây là sự lai ghép của cả hai kỹ thuật trên. Phần trên của sắc ký tăng dần có thể được gấp lại trên một thanh để cho phép giấy rơi xuống sau khi băng qua thanh.
Chromatography trên giấy vạch – Đây gọi là phép sắc ký tròn. Một tấm giấy lọc tròn được lấy ra và mẫu được gửi ở giữa giấy. Sau khi làm khô tại chỗ, giấy lọc được xếp theo chiều ngang trên một đĩa petri chứa dung môi, do đó các wick của giấy được nhúng vào trong dung môi. Dung môi này tăng lên qua phần wick và các thành phần được tách ra thành các vòng tròn đồng tâm.
Chữ sắc ký hai chiều – Trong kỹ thuật này sử dụng giấy vuông hoặc chữ nhật. Ở đây, mẫu được áp dụng cho một trong các góc và sự phát triển được thực hiện ở một góc phải với hướng chạy lần đầu tiên.
Lịch sử
Việc phát hiện ra sắc ký giấy vào năm 1943 bởi Martin và Synge đã cung cấp, lần đầu tiên, các phương tiện khảo sát các thành phần của cây cối, để phân tách và nhận biết chúng. Có một sự bùng nổ hoạt động trong lĩnh vực này sau năm 1945