Chromatofocusing là một protein tách kỹ thuật que Cho phép độ phân giải của protein đơn và ampholytes khác từ một hỗn hợp phức tạp của họ Theo sự khác biệt về điểm đẳng điện. Chromatofocusing khuyến khích cho các loại nhựa trao đổi ion sử dụng và thường được thực hiện trên protein nhanh sắc ký lỏng (FPLC) hoặc thiết bị tương tự có khả năng tạo gradient liên tục đệm mặc dù đây không phải là một yêu cầu.
Ngược lại với đặc trưng sắc ký trao đổi ion, nơi phân tử ràng buộc được tách rửa từ nhựa bằng cách tăng sức mạnh ion của môi trường đệm, chromatofocusing loài elutes ràng buộc bằng cách thay đổi độ pH của bộ đệm. Điều này làm thay đổi lượng bề mặt ròng của các phân tử bị ràng buộc, thay đổi sự nhút nhát của chúng đối với nhựa.
Khi thay đổi pH của hệ đệm đi qua pI của phân tử Given, phân tử sẽ rửa giải từ nhựa vì nó sẽ không còn có tích điện bề mặt lưới (đối với điều kiện tiên quyết ràng buộc với các loại nhựa trao đổi ion phân tử). Chromatofocusing là một kỹ thuật mạnh mẽ để lọc đối với protein nó chỉ có thể giải quyết loài rất giống nhau bởi 0:02 Khác với các đơn vị pH đó có thể không tách tốt, hoặc ở tất cả, sử dụng chiến lược trao đổi ion truyền thống với. Hạn chế lớn nhất của kỹ thuật này là một số protein sẽ tổng hợp khi chúng có mặt ở nồng độ tương đối cao và mang điện tích trên mặt đất.
Điều này có thể gây tắc nghẽn của nhựa, rất có vấn đề khi sử dụng các cột niêm phong của nhựa trao đổi ion trên thiết bị FPLC, dẫn tới sự gia tăng áp suất và sự thất bại của thiết bị. Các vấn đề tập hợp rõ ràng đôi khi có thể được khắc phục bằng cách hạn chế nồng độ mẫu và sử dụng chất phụ gia đệm để ngăn chặn sự hình thành tổng hợp.