Tương đối đơn giản Thông thường các thiết bị được sử dụng để áp dụng Tăng gradient của counterions vào cột sắc ký. Counterions như Copper (II) được lựa chọn Thường thì nó là một cách hiệu quả nhất tách axit amin và peptide qua hình phức tạp.
Một thiết bị đơn giản có thể được sử dụng để tạo ra một muối gradient. Rửa giải đệm được liên tục được rút ra từ buồng vào buồng trộn, Qua đó làm thay đổi bộ đệm nồng độ của nó. Nói chung, bộ đệm Đặt vào buồng là nồng độ ban đầu cao Thông thường, khi đó bộ đệm vào Đặt Khuấy buồng là thường của nồng độ thấp. Khi đệm nồng độ cao từ buồng trái là hỗn hợp và bị lôi kéo vào các cột, nồng độ đệm của cột Khuấy Dần dần Tăng. Thay đổi hình dạng của buồng Khuấy động, cũng như các giới hạn đệm, Cho phép để sản xuất lõm, thẳng, hoặc gradient lồi của counterion.
Một trong nhiều phương tiện khác nhau được sử dụng cho giai đoạn tĩnh. Trong số các nhóm tính cố định phổ biến nhất được sử dụng là trimethylaminoethyl (TAM), triethylaminoethyl (TEAE), diethyl-2-hydroxypropylaminoethyl (HEC), aminoethyl (AE), diethylaminoethyl (DEAE), sulpho (S), sulphomethyl (SM), sulphopropyl ( SP), carboxy (C), và carboxymethyl (CM).
đóng gói thành công của cột là một khía cạnh quan trọng của sắc ký ion. Ổn định và hiệu quả của cột cuối cùng phụ thuộc vào phương pháp đóng gói, dung môi được sử dụng, và các yếu tố ảnh hưởng đến que tính chất cơ học của cột. Ngược lại với phương pháp đầu khô không hiệu quả bao bì, đóng gói ướt bùn, trong đó các hạt lơ lửng trong đó dung môi thích hợp được cung cấp vào cột dưới áp lực, họ thấy sự cải thiện đáng kể.
Ba cách tiếp cận khác nhau có thể được sử dụng trong việc thực hiện đóng gói bùn ướt: phương pháp mật độ cân bằng (mật độ dung môi là về điều đó của các hạt silica xốp), phương pháp độ nhớt cao (một dung môi có độ nhớt cao được sử dụng), và độ nhớt thấp phương pháp bùn (Thực hiện dung môi có độ nhớt thấp)
Polystyrene được sử dụng làm môi trường trao đổi ion. Nó được tạo ra từ quá trình trùng hợp styrene với việc sử dụng divinylbenzen và benzoyl peroxide. Những chất trao đổi này tạo thành tương tác k hydro nước với các protein có thể không thể đảo ngược được. Do tính chất này, các bộ trao đổi ion polystyrene không thích hợp để tách protein. Chúng được sử dụng để tách các phân tử nhỏ trong phân tách axit amin và loại bỏ muối khỏi nước. Các chất trao đổi ion Polystyrene có lỗ chân lông lớn có thể được sử dụng để tách protein nhưng phải được phủ một chất hydrophillic.
Cellulose dựa trên môi trường có thể được sử dụng để tách các phân tử lớn vì chúng chứa các lỗ lớn. Protein ràng buộc trong môi trường này là cao và có tính k low nước thấp. DEAE là một ma trận trao đổi anion được sản xuất từ một nhóm phụ tích cực của diethylaminoethyl gắn với cellulose hoặc Sephadex.
Agarose gel dựa trên môi trường có chứa các lỗ chân lông lớn cũng như khả năng thay thế của chúng là thấp hơn so với dextrans. Khả năng của môi trường để nở trong chất lỏng dựa trên sự liên kết chéo của các chất này, độ pH và nồng độ ion của các bộ đệm được sử dụng .
Sự kết hợp của nhiệt độ và áp suất cao cho phép gia tăng đáng kể hiệu suất sắc ký ion, cùng với sự giảm thời gian. Nhiệt độ có ảnh hưởng của tính chọn lọc do ảnh hưởng của nó lên các tính chất giữ lại. Hệ số lưu giữ (k = (tRg – tMg) / (tMg – text)) tăng với nhiệt độ cho các ion nhỏ, và xu hướng ngược lại đối với các ion lớn hơn.
Mặc dù sự chọn lọc ion trong các môi trường khác nhau, đang tiến hành nghiên cứu sâu hơn để thực hiện sắc ký trao đổi ion trong khoảng 40-175 oC.
Một dung môi thích hợp có thể được lựa chọn dựa trên các quan sát làm thế nào các hạt cát cư xử trong một dung môi. Sử dụng kính hiển vi quang học, người ta có thể dễ dàng phân biệt một trạng thái phân tán mong muốn từ bùn từ hạt tổng hợp