Sắc ký lớp mỏng – Phần 3

Quá trình ly thân và nguyên tắc
các hợp chất khác nhau trong chuyến du lịch hỗn hợp mẫu với tốc độ khác nhau do sự khác biệt về thu hút của họ đối với các pha tĩnh và vì sự khác biệt trong khả năng hòa tan trong dung môi. Bằng cách thay đổi dung môi, hoặc có lẽ sử dụng hỗn hợp này, việc tách các thành phần (được đo bằng giá trị Rf) có thể được điều chỉnh. Ngoài ra, việc tách Đạt được với TLC tấm có thể được sử dụng để ước tính sự tách biệt của một cột sắc ký nhấp nháy. (Hợp chất elutes từ cột Khi lượng dung môi thu thập bằng 1 / f.)  Thông thường sử dụng hóa học TLC để phát triển một giao thức để tách bằng sắc ký và TLC Họ sử dụng để xác định nào phân số mong muốn chứa các hợp chất.

 

Phát triển của một tấm TLC, chỗ tím tách thành một điểm màu đỏ và màu xanh

Bề mặt của một tấm ván mới cắt của Eucalyptus camaldulensis hiển thị sắc ký lớp mỏng. Các dải màu xanh là ngang từ phản ứng giữa sắt và sự hỗ trợ có tính axit gỗ cưa vòng
Tách các hợp chất được dựa trên sự cạnh tranh của các chất tan và pha động để gắn kết các trang web trên pha tĩnh. Ví dụ, nếu giai đoạn silica-gel bình thường được sử dụng để pha tĩnh, nó có thể được coi là cực. Với hai hợp chất que khác nhau về phân cực, hợp chất cực hơn có một sự tương tác chặt chẽ hơn với silica và, vì vậy, có khả năng tốt hơn để thay thế các pha động từ các trang web liên kết có sẵn. Kết quả là, các hợp chất ít cực di chuyển lên cao hơn tấm (Hệ quả là giá trị Rf cao hơn) . Nếu pha động được thay đổi thành một dung môi phân cực hơn hoặc hỗn hợp các dung môi, nó passe tốt hơn ở liên kết với các tấm và cực chất tan Vì vậy thay từ nó, tất cả đều hợp chất trên tấm TLC sẽ di chuyển lên cao hơn tấm. Nó thường nói rằng các dung môi “mạnh” (eluant) đẩy các hợp chất Phân tích lên tấm, Xét thấy “yếu” eluant hiếm khi di chuyển chúng. Trình tự của sức mạnh / yếu phụ thuộc vào lớp phủ (pha tĩnh) của tấm TLC. Đối với silica-gel bọc tấm TLC, các Tăng sức mạnh rửa giải theo trình tự sau: perfluoroalkane (yếu nhất), hexan, pentan, carbon tetrachloride, benzen / toluene, Dichloromethane, diethyl ether, ethyl acetate, acetonitrile, acetone, 2-propanol / n butanol, nước, methanol, trietylamine, axit axetic, axit formic (mạnh nhất). Đối với các tấm phủ C18, thứ tự là ngược lại. Nói cách khác, Khi giai đoạn cực là tĩnh và pha động là không phân cực, phương pháp thông thường là những pha phản đối ngược pha. Đây đó có nghĩa là nếu một hỗn hợp etyl acetate và hexane để pha động được sử dụng, bổ sung thêm kết quả ethyl acetate Rf trong giá trị cao hơn cho tất cả các hợp chất trên tấm TLC. Thay đổi tính phân cực của pha động sẽ thường không dẫn đến trật tự đảo ngược của hoạt động của các hợp chất trên tấm TLC. Một loạt eluotropic thể được sử dụng như một hướng dẫn trong việc lựa chọn một giai đoạn di động. Nếu thứ tự đảo ngược của hoạt động của các hợp chất được mong muốn, một pha tĩnh apolar nên được sử dụng, chẳng hạn như silica C18-chức hóa

Leave a Comment

Your email address will not be published. Required fields are marked *

Scroll to Top