Spectrophotometry – Phần 1

Trong hóa học, phép đo quang phổ là phép đo định lượng các phản xạ hoặc tính chất truyền của vật liệu theo chức năng của bước sóng . Đó là cụ thể hơn quang phổ điện từ ngữ nói chung đó giao dịch Phổ với ánh sáng nhìn thấy, gần như tia cực tím, và hồng ngoại gần, nhưng không bao gồm các kỹ thuật quang phổ thời gian giải quyết.

Phép đo quang phổ sử dụng các phép đo quang phổ, được gọi là quang phổ kế, có thể đo cường độ của chùm tia như là một chức năng của màu sắc của nó (bước sóng). tính năng quan trọng của quang phổ là băng thông quang phổ (khoảng màu sắc nó có thể truyền tải thông qua các mẫu thử nghiệm), tỷ lệ mẫu-truyền, phạm vi logarit của mẫu-hấp thụ, và đôi khi tỷ lệ đo hệ số phản xạ.

Phổ quang phổ thường được sử dụng để đo độ truyền hoặc phản xạ của các dung dịch, các chất rắn trong suốt hoặc mờ đục, chẳng hạn như kính đánh bóng, hoặc khí. Mặc dù nhiều chất hóa sinh có màu như trong, Họ hấp thụ ánh sáng nhìn thấy và vì vậy có thể được đo bằng thủ tục đo màu, thậm chí hóa sinh không màu thường có thể được chuyển đổi sang hợp chất màu thích hợp cho phản ứng màu sắc hình thành để mang lại chất chromogenic phù hợp để phân tích đo màu . Tuy nhiên họ cũng có thể được thiết kế để đo độ khuyếch tán vào bất kỳ que dãy ánh sáng được liệt kê thường bao gồm khoảng 200 nm – 2500 nm sử dụng các điều khiển khác nhau và kiểm định . Trong Các phạm vi của ánh sáng, hiệu chuẩn là cần thiết trên máy sử dụng Tiêu chuẩn này khác nhau về loại phụ thuộc vào bước sóng của việc xác định trắc quang. 

Một ví dụ của một thí nghiệm trong đó quang phổ được sử dụng là xác định hằng số cân bằng của một dung dịch. Một phản ứng hóa học nhất định trong dung dịch có thể xảy ra theo hướng chuyển tiếp và ngược lại, nơi các chất phản ứng tạo thành các sản phẩm và các sản phẩm phân hủy thành các chất phản ứng. Vào một thời điểm nào đó, phản ứng hóa học này sẽ đạt đến một điểm cân bằng được gọi là điểm cân bằng. Để xác định nồng độ tương ứng của các chất phản ứng và sản phẩm tại thời điểm này, truyền ánh sáng của giải pháp có thể được kiểm tra bằng quang phổ. Lượng ánh sáng đi qua dung dịch chỉ ra nồng độ của một số hoá chất nhất định không cho phép ánh sáng đi qua.

Sự hấp thụ ánh sáng là do sự tương tác của ánh sáng với các chế độ điện tử và rung động của các phân tử. Mỗi loại phân tử có một bộ riêng biệt của mức năng lượng liên quan đến việc trang điểm của liên kết hóa học và hạt nhân của nó, và Như vậy sẽ hấp thụ ánh sáng của các bước sóng cụ thể, hoặc năng lượng, trong Kết quả tính phổ độc đáo . Điều này được dựa trên trang điểm cụ thể và khác biệt của nó.

Việc sử dụng quang phổ trải rộng lĩnh vực khoa học khác nhau, chẳng hạn như vật lý, khoa học vật liệu, hóa học, hóa sinh, sinh học phân tử và . Chúng được sử dụng rộng rãi trong nhiều ngành công nghiệp bao gồm các chất bán dẫn, sản xuất quang học và laser, in ấn và giám định pháp y, cũng như trong các phòng thí nghiệm cho việc nghiên cứu các chất hóa học. Thường Phổ được sử dụng trong các phép đo các hoạt động enzyme, xác định nồng độ của protein, xác định enzyme của các hằng số động học và các phép đo các phản ứng ràng buộc ligand. Cuối cùng, quang phổ có thể xác định, tùy thuộc vào sự kiểm soát hoặc hiệu chuẩn, những gì chất có mặt trong các mục tiêu và chính xác bao nhiêu quan sát thông qua tính toán của bước sóng.

Trong thiên văn học, các Phổ hạn Đề cập đến các phép đo quang phổ của một vật thể vũ trụ, trong đó quy mô thông lượng của quang phổ được hiệu chỉnh như một hàm của bước sóng, thường bằng cách so sánh với một quan sát của ngôi sao quang phổ chuẩn, và điều chỉnh cho sự hấp thụ Trong ánh sáng của khí quyển trái đất.