Sắc ký Ion – Phần 3

Sắc ký trao đổi ion phân tách các phân tử dựa trên các nhóm tích điện của chúng. sắc ký trao đổi ion Giữ lại các phân tử chất phân tích trên cột dựa trên coulombic tương tác (ion). Về cơ bản, các phân tử trải qua các tương tác tĩnh điện với chi phí đối diện trên ma trận được nhồi pha tĩnh. Các pha tĩnh Gồm một ma trận bất chứa que tính nhóm chức ionizable hoặc ligand..

Bề mặt pha tĩnh sẽ hiển thị các nhóm chức năng ion (R-X) tương tác với các ion chất phân tích phí ngược lại. Để Đạt electroneutrality, Những phim hoạt hình trơ vài với counterions trao đổi trong dung dịch. phân tử Ionizable que sẽ được tịnh hóa cạnh tranh với Những counterions trao đổi cho ràng buộc ở những chi phí cố định trên pha tĩnh. Các phân tử ionizable này được giữ lại hoặc eluted dựa trên tính phí của chúng. Ban đầu, các phân tử que không ràng buộc hoặc ràng buộc một cách yếu ớt với pha tĩnh là người đầu tiên rửa sạch. điều kiện thay đổi là cần thiết cho việc rửa giải của các phân tử gắn với giai đoạn tĩnh.

Nồng độ của counterions đổi nào cạnh tranh với các phân tử liên kết được, có thể tăng lên hoặc độ pH có thể được thay đổi. Sự thay đổi trong pH ảnh hưởng đến điện tích trên các phân tử và đặc biệt, Do đó, làm thay đổi ràng buộc. Các phân tử bắt đầu tẩy rửa Sau đó, vào tháng dựa trên những thay đổi trong chi phí của họ từ những điều chỉnh. Những điều chỉnh như vậy có thể được sử dụng để giải phóng protein quan tâm. Ngoài ra, nồng độ các phản ứng có thể thay đổi để phân tách các phân tử riêng biệt. Loại rửa này được gọi là elution gradient. Mặt khác, bước rửa giải có thể sử dụng ở nồng độ counterion đang dao động trong một bước.

Đây là loại sắc ký là tiếp tục chia thành sắc ký trao đổi cation và anion trao đổi sắc ký. các phân tử tích điện dương liên kết với nhựa trao đổi anion trong khi các phân tử tích điện âm liên kết với nhựa trao đổi cation . Các Gồm các ion hợp chất M + loài cation và anion loài B có thể được giữ lại bởi các pha tĩnh.

sắc ký trao đổi cation giữ lại điện tích dương cation vì pha tĩnh sẽ hiển thị một nhóm chức năng tích điện âm:

{\text{R-X}}^{-}{\text{C}}^{+}\,+\,{\text{M}}^{+}\,{\text{B}}^{-}\rightleftarrows \,{\text{R-X}}^{-}{\text{M}}^{+}\,+\,{\text{C}}^{+}\,+\,{\text{B}}^{-}

Lưu ý que sức mạnh ion của một trong hai C + hoặc A- trong giai đoạn di động có thể được điều chỉnh để thay đổi vị trí cân bằng, vậy đội duy trì.

{\text{R-X}}^{+}{\text{A}}^{-}\,+\,{\text{M}}^{+}\,{\text{B}}^{-}\rightleftarrows \,{\text{R-X}}^{+}{\text{B}}^{-}\,+\,{\text{M}}^{+}\,+\,{\text{A}}^{-}

Dạng sắc ký ion cho thấy một sắc ký đồ điển hình thu được với một cột trao đổi anion.

Leave a Comment

Your email address will not be published. Required fields are marked *

Scroll to Top