Sắc ký sinh học
Quá trình sắc ký này dựa vào tính chất của các chất hoạt tính sinh học để hình thành phức hợp ổn định, cụ thể và có thể đảo ngược. Sự hình thành các phức hợp này liên quan đến sự tham gia của các lực lượng phân tử phổ biến như tương tác Van der Waals, tương tác tĩnh điện, tương tác lưỡng cực-lưỡng cực, tương tác k hydro nước, và liên kết hydro. Một mối liên kết hiệu quả, biospecific được hình thành bởi một hành động đồng thời và phối hợp của một số trong những lực lượng này trong các trang web ràng buộc bổ sung.
Dung dịch sắc ký lỏng bình thường
Phép sắc ký bình thường trong nước (ANP) là một kỹ thuật sắc ký bao gồm vùng pha di động giữa sắc ký đảo ngược pha (RP) và phép sắc ký bình thường hữu cơ (ONP). Kỹ thuật này được sử dụng để đạt được tính chọn lọc độc đáo đối với các hợp chất ưa nước, cho thấy việc rửa mặt bằng bình thường bằng các dung môi đảo ngược.
Isocratic và elution gradient
Sự tách rời trong đó thành phần giai đoạn di động vẫn không đổi trong suốt quá trình được gọi là tính phân cực (có nghĩa là thành phần không đổi). Từ này được đặt ra bởi Csaba Horvath, người đã từng là một trong những người tiên phong của HPLC [cần dẫn nguồn],
Thành phần pha di động không phải là hằng số. Sự tách rời trong đó thành phần giai đoạn di động được thay đổi trong quá trình tách được mô tả như một phép rửa gradient. [12] Một ví dụ là một gradient bắt đầu từ 10% methanol và kết thúc ở 90% methanol sau 20 phút. Hai thành phần của pha di động thường được gọi là “A” và “B”; A là dung môi “yếu”, cho phép chất tan chỉ được làm chậm, trong khi B là dung môi “mạnh” nhanh chóng loại bỏ các chất tan khỏi cột. Trong sắc ký đảo ngược pha, dung môi A là Thường nước hoặc một bộ đệm chứa nước, trong khi B là một dung môi có thể trộn hữu cơ với nước, chẳng hạn như axetonitril, metanol, THF hoặc isopropanol.
Trong elution isocratic, chiều rộng đỉnh tăng với thời gian lưu giữ tuyến tính theo phương trình cho N, số lượng các tấm lý thuyết. Điều này dẫn đến bất lợi là các đỉnh núi muối trôi cuối rất dẹt và rộng. Hình dạng và chiều rộng của chúng có thể khiến chúng không được coi là đỉnh.
rửa giải Gradient giảm việc lưu giữ sau này tẩy rửa linh kiện là que Họ rửa giải nhanh hơn, đem lại đỉnh hẹp (và cao hơn) đối với hầu hết các thành phần. Nó cũng cải thiện hình dạng đỉnh cho các đỉnh núi đuôi, vì nồng độ ngày càng tăng của chất làm sạch hữu cơ thúc đẩy phần đuôi của đỉnh cao về phía trước. Điều này cũng làm tăng chiều cao đỉnh điểm (đỉnh có vẻ “sắc nét hơn”), điều này rất quan trọng trong việc phân tích dấu vết. Chương trình có thể bao gồm độ dốc đột ngột “bước” Tăng tỷ lệ phần trăm của các thành phần hữu cơ, hoặc dốc khác nhau vào những thời điểm khác nhau – Theo tất cả các mong muốn tách tối ưu trong thời gian tối thiểu.
Trong elution isocratic, sự chọn lọc không thay đổi nếu kích thước cột (chiều dài và đường kính trong) thay đổi – nghĩa là, các đỉnh được tách trong cùng một thứ tự. Trong […] lệnh elution có thể thay đổi kích thước hoặc thay đổi tốc độ dòng chảy. [Trích dẫn cần thiết]
Động lực trong phép sắc ký đảo pha bắt nguồn từ trật tự cao của cấu trúc nước. Vai trò của thành phần hữu cơ của pha động là làm giảm thứ tự cao này và do đó làm giảm độ bền kéo của thành phần nước.